熒光PCR凍干之二糖

二糖又名雙糖, 雙糖是碳水化合物的一種。它是由兩個單糖分子經(jīng)縮合反應(yīng)除去一個水分子而成的糖。例如乳糖由葡萄糖和半乳糖組成，蔗糖由葡萄糖和果糖組成，麥芽糖由兩個葡萄糖組成等。二糖作為常用的凍干保護(hù)劑，能夠有效增加蛋白凍干穩(wěn)定性，但是用它們作保護(hù)劑得到的無定形蛋白凍干固體具有較低的Tg，對儲存過程中的高溫和高濕條件耐受較差。大分子量糖能夠增加凍干后固體的Tg，增加凍干后穩(wěn)定性，但是對于低濃度蛋白活性保護(hù)作用不理想。例如蔗糖對蛋白質(zhì)具有保護(hù)作用，葡聚糖在冷凍和干燥過程中不能防止蛋白質(zhì)變性，而蔗糖與葡聚糖的混合物則大大提高了在冷凍干燥及儲存過程中蛋白質(zhì)的保護(hù)作用。盡管葡聚糖不能單獨(dú)作為蛋白質(zhì)的保護(hù)劑，但它具有高Tg，并能提高凍干蛋白質(zhì)的儲藏質(zhì)量，因此和蔗糖等其它保護(hù)劑混合使用可以防止蛋白質(zhì)的損傷，提高產(chǎn)品的質(zhì)量。糖對蛋白質(zhì)的保護(hù)作用的大小和其濃度有關(guān)，通常在某個濃度范圍內(nèi)，糖的保護(hù)作用隨著濃度的升高而增大，達(dá)到某一濃度時，保護(hù)作用達(dá)到大值。這時在增大糖的濃度，保護(hù)作用不會明顯增加，有時反而會降低。海藻糖作為熒光PCR凍干保護(hù)劑的其中一種，既能在冷凍過程中充當(dāng)?shù)蜏乇Ｗo(hù)劑，又能在干燥脫水過程中起到脫水保護(hù)劑的作用。由凍干保護(hù)劑制備得到的熒光PCR凍干制劑可長期常溫保存，且復(fù)溶速度快。