熒光PCR凍干之聚合物

聚合物又稱加聚物。由一種單體經(jīng)聚合(加聚)反應而成的產(chǎn)物。分子具有重復的結(jié)構(gòu)單位。包括晶態(tài)結(jié)構(gòu)、非晶態(tài)結(jié)構(gòu)、取向態(tài)結(jié)構(gòu)以及織態(tài)結(jié)構(gòu)。聚合物包括聚乙二醇、PVP、明膠、聚乙烯亞胺等。聚合物常用作為蛋白質(zhì)的冷凍保護劑，通常聚合物的穩(wěn)定作用取決于聚合物的多重性質(zhì) , 如優(yōu)先從蛋白質(zhì)表面析出、 表面活性 、使蛋白質(zhì)溶液私度升高從而阻止其他小分子(如 糖及 多輕基化合物 ) 的結(jié)晶 、 抑制冷凍過程中p H 值的劇烈變化等。 不同聚合度及濃度的聚合物所提供的保護作用不同 , 如聚合度大的 P v P 有著較高的玻璃化溫度 , 隨著 P v P濃度及分子量增加 , 水溶液的私度隨之變大 , 例如蔗糖的玻璃化溫度明顯升高 , 對冷凍過程中的蛋白質(zhì)所起的保護作用 隨之也有所增加 ; 但聚合度過大時 , 聚合物會在冷凍過程中結(jié)晶 , 從而失去對蛋白質(zhì)的保護作用 , 而且濃度及分子量過大時會增加終產(chǎn)品的水分 , 使得制品中蛋白質(zhì)變得更不穩(wěn)定 。熒光PCR凍干時的幾種保護劑使用范圍:二硫蘇糖醇的濃度為0.2-1mm，吐溫20的濃度為0.2%-1%（v/v），海藻糖的濃度為0.2m以下，明膠的質(zhì)量體積比為0.1%-1%（w/v），bsa的濃度為0.2-1mg/ml；